1.首要原則:細胞不重要情況下立即丟棄,培養(yǎng)箱滅菌,所用培養(yǎng)基也都要丟棄,器械等重新滅菌或拆用新的。
2.細菌污染一般都救不回來了,發(fā)現(xiàn)的時候培養(yǎng)基一般都很渾濁且細胞都死了
3.真菌污染且細胞很重要時:
遇到念球菌污染,且細胞為基因改造細胞,非常重要。如231貼壁乳腺癌細胞,發(fā)現(xiàn)細胞周圍出現(xiàn)很小的串珠透亮圓點,非常像念球菌污染,此時細胞狀態(tài)尚可,且污染少。處理如下:用預(yù)熱或室溫PBS清洗3次,可適當(dāng)振搖,將污染沖洗下來。隨后加入10-20%雙抗到培養(yǎng)瓶,置于37度培養(yǎng)箱1h,之后再用PBS清洗三遍,直至視野下無可見污染。此時細胞也被沖下大部分,因此此方法只適用在細胞貼壁強,狀態(tài)好,密度高時使用。之后每天再更換培養(yǎng)基,每次用PBS沖洗2遍。過幾天細胞狀態(tài)尚可時,消化離心時用500r,3min,去掉上清,重復(fù)3次。這個方法是根據(jù)文獻可利用念球菌和細胞體積重量差異實現(xiàn)分離?;旧线@一步做完以后,污染就基本清除了,接下來就注意多觀察,勤換液就行。
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