2XSYBR Green qPCR Master Mix (with High Rox)
2XSYBR Green qPCR Master Mix (with High Rox)
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目錄號：M00601 保存：-20C避光保存一年
產(chǎn)品簡介
該產(chǎn)品經(jīng)過特殊的優(yōu)化方案配置*合適 的反應(yīng)緩沖液，其中含有熱啟動的Taq酶， dNTPs、PCR增強劑、PCR穩(wěn)定劑、SYBR Green I染料以及具有儀器校準(zhǔn)作用的ROX。 該產(chǎn)品的濃度為2x，使用時只需要加入cDNA 模板以及相應(yīng)的上下游檢測引物和水，將其制 成 1x工作溶液，即可進行Real-time PCR的檢 測。經(jīng)過多種優(yōu)化探索，使得該產(chǎn)品在擴增特 異性、靈敏性以及數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性方面均具有突出的表現(xiàn)。該產(chǎn)品含有適用多種機型的ROX, 主要包括 ABI 7500/7500 fast/7900/
7900HT /ABI QuaatStudio 3/5以及 Heal force X960等。
試劑盒組成
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試劑盒成分 |
M00601-1 |
M00601-2 |
M00601-3 |
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2xSYBR Green qPCR Master Mix |
1.25 ml |
4x 1.25 ml |
12 x 1.25 ml |
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DNase-ftee RNase- free H2O (自備) |
1ml |
4xlml |
12 x 1ml |
推薦qPCR反應(yīng)體系（以20ul反應(yīng)體系為例）
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試劑盒成分 |
體積 |
終濃度 |
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cDNA Template |
2ul |
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Forward Primer (10 uM) |
0.4ul |
0.2 uM |
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Reverse Primer (10 uM) |
0.4ul |
0.2 uM |
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2XSYBR Green qPCR Master Mix |
10ul |
1X |
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DNase-free RNase-free H2O |
7.2ul |
- |
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Total volume |
20ul |
- |
（對于基因組DNA,建議的模板量為10pg-1ug;對于質(zhì)粒DNA,建議的模板量為10-107 Copies）
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qPCR (三步法） |
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94°C |
2min |
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94°C |
5sec _ |
40 cycles |
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50-60°C |
15sec |
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72°C |
10sec _ |
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qPCR （兩步法） |
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94°C |
2min |
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94°C |
5sec — |
40 cycles |
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60°C |
30sec — |
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高擴增效率選擇三步法，高特異性選擇兩步法
注：
1、 使用時徹底化凍混勻；
2、 本產(chǎn)品*供科學(xué)研究使用。
