兔肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離培養(yǎng)及鑒定
【簡介】
血管內(nèi)皮細(xì)胞通常指襯于心、血管和淋巴管內(nèi)表面的單層扁平上皮,也稱內(nèi)皮細(xì)胞。在炎癥時高表達(dá)黏附分子,與血流中白細(xì)胞表面黏附分子相互作用,從而介導(dǎo)白細(xì)胞穿越血管壁,在血栓與止血、動脈粥樣硬化、炎癥及免疫反應(yīng)等病理生理過程發(fā)揮重要作用;
【材料】
3-8周齡兔、手術(shù)剪、手術(shù)鑷、75%酒精、雙抗PBS、M199、FBS、培養(yǎng)皿、15ml離心管;
【方法】
1)處死小鼠,酒精浸泡5min,打開胸腔取出肺組織;
2)將組織剪碎,1mm×1mm×1mm大小,PBS清洗直至上清清澈;
3)將組織均勻的鋪在明膠處理過的培養(yǎng)皿上,放入培養(yǎng)箱,2h后補(bǔ)少量培養(yǎng)液,沒過組織即可,第二天補(bǔ)齊適量培養(yǎng)液;
【培養(yǎng)】
內(nèi)皮專用培養(yǎng)液
三、鑒定
陽性:CD31,VWF;