【簡介】
平滑?。?xì)胞)雖有如斧足類的閉殼肌和足系牽引肌等是由平行走向長纖維狀細(xì)胞(平滑肌纖維)所構(gòu)成,但多數(shù)的平滑肌則是由長紡錘形(脊椎動物的內(nèi)臟肌長不到1毫米)的單核細(xì)胞構(gòu)成;
【材料】
培養(yǎng)皿,手術(shù)剪,彎頭手術(shù)鑷,10%FBS的DMEM,雙抗PBS或Hanks,75%酒精;
【方法】
1)75%酒精浸泡SD大鼠;
2)開脖頸、胸腔,取出氣管,泡雙抗PBS;
3)去除食管和其他組織,從軟骨環(huán)一側(cè)剪開氣管,彎頭鑷子橫向刮氣管內(nèi)外層,留中層平行條紋的氣管平滑肌組織;
4)組織移入含培液EP管,剪碎組織漂洗,800R/3min離心,重復(fù)3次;
5)取組織塊貼壁于培養(yǎng)皿,干貼1-2h,補上培液37°培養(yǎng);
【培養(yǎng)】
DMEM培養(yǎng)基(10%FBS)
圖為SD大鼠氣管平滑肌細(xì)胞P1代
【鑒定】
免疫熒光:
陽性:Desmin、α-SMA;