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實(shí)驗(yàn)技巧——做好細(xì)胞凍存,保證細(xì)胞質(zhì)量

如何凍存細(xì)胞,保證細(xì)胞質(zhì)量,上海東寰生物與您一起分享。
實(shí)驗(yàn)技巧——做好細(xì)胞凍存,保證細(xì)胞質(zhì)量

1、吸去舊培養(yǎng)液。


2、PBS沖洗3次,每次2ml。


3、吸去PBS,胰酶1.5ml,放入孵育箱,消化4min后取出觀察細(xì)胞懸浮情況。


4、3ml培液中止消化,輕輕吹打至底壁透光,制成細(xì)胞懸液。


5、吸入15ml離心管中,1000r/5min離心。


6、吸去上清,加入1ml凍存液(凍存液配制方法:DMSO和血清按1:9配制成10ml,離心管外面裹一層鋁箔避光,放入4度冰箱保存),吹打均勻,吸入凍存管中。


7、放入梯度降溫盒,-80℃冰箱過(guò)夜。


8、24h后從梯度盒取出凍存管,放入液氮罐保存(長(zhǎng)期保存需放入液氮罐,短期3個(gè)月內(nèi)凍存放入-80攝氏度即可)。