細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)服務(wù)

細(xì)胞轉(zhuǎn)染（Transfection）是指將DNA或者RNA導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過程。轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白，或特異性增強(qiáng)或控制轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的基因表達(dá)。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可以分為兩大類，一類為瞬時轉(zhuǎn)染，一類為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株）。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)服務(wù)

細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
（DH0002）

一、服務(wù)介紹
細(xì)胞轉(zhuǎn)染（Transfection）是指將DNA或者RNA導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過程。轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白，或特異性增強(qiáng)或控制轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的基因表達(dá)。
常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可以分為兩大類，一類為瞬時轉(zhuǎn)染，一類為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株）。

二、服務(wù)內(nèi)容及價格

服務(wù)編號	服務(wù)內(nèi)容	服務(wù)價格	服務(wù)周期（工作日）
DH0002-1	瞬時轉(zhuǎn)染	詢價	7-10
DH0002-2	穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株）	詢價	7-10

注：
瞬時轉(zhuǎn)染：是指外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，存在于游離的載體上，不整合到細(xì)胞的染色體上，在外源基因?qū)爰?xì)胞1-4天后收獲細(xì)胞對目的基因的表達(dá)進(jìn)行檢測。特點(diǎn)是周期短、價格低、操作簡單。
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染：外源片段插入染色體，整合到宿主染色體上，從而外源基因成為細(xì)胞基因組的一部分從而帶到復(fù)制，得到穩(wěn)定表達(dá)。載體被轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞并整合到宿主染色體中，用載體中所含的抗性標(biāo)志進(jìn)行篩選，篩選得到可穩(wěn)定過表達(dá)目的蛋白，或沉默特定基因的細(xì)胞株。

三、客戶提供
1．客戶根據(jù)需要選擇做的實(shí)驗(yàn)，提供相應(yīng)

瞬轉(zhuǎn)	穩(wěn)轉(zhuǎn)
供生長狀態(tài)良好的細(xì)胞株（或由我公司**）
目的基因信息或提供化學(xué)合成序列、一抗	目的基因信息或質(zhì)粒、一抗

2．實(shí)驗(yàn)前，客戶需告知具體的細(xì)胞處理方式及詳細(xì)要求。
注：若有特殊處理的樣品，請盡可能出示相關(guān)材料（具有保密性的材料除外）。

四、服務(wù)流程

瞬轉(zhuǎn)	穩(wěn)轉(zhuǎn)
導(dǎo)入的DNA沒有整合到基因組中，而是保留在細(xì)胞核上	導(dǎo)入的DNA整合到基因組中
導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)不傳遞到子代；遺傳改變只是暫時的	導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)能夠代代相傳；遺傳改變是**的
不需要選擇性篩選	需要選擇性篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞
DNA載體和RNA都可用于瞬時轉(zhuǎn)染	只有DNA載體可用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染；RNA本身不能穩(wěn)定地導(dǎo)入細(xì)胞中
導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)的高拷貝數(shù)導(dǎo)致高水平的蛋白質(zhì)表達(dá)。	單拷貝數(shù)或低拷貝數(shù)的穩(wěn)定整合的DNA導(dǎo)致較低水平的蛋白質(zhì)表達(dá)。
通常在轉(zhuǎn)染后24-96小時內(nèi)收獲細(xì)胞。	需要2-3周的時間篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞克隆。
通常不適合使用具有誘導(dǎo)型啟動子的載體的研究。	適用于使用帶有誘導(dǎo)型啟動子的載體的研究。

五、提交給客戶結(jié)果

瞬轉(zhuǎn)	穩(wěn)轉(zhuǎn)
確認(rèn)目的序列的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率	篩選好的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞
通過熒光定量PCR和Westernblot實(shí)驗(yàn)進(jìn)行目的基因相關(guān)檢測報告。	提供篩選過程的實(shí)驗(yàn)報告及驗(yàn)證結(jié)果圖