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LPS脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型

膿毒癥所致ARDS的患者死亡率較高,在臨床治療中,膿毒癥所導(dǎo)致的多器官功能障礙或衰竭死亡率極高,流行病學(xué)調(diào)查顯示,全球每年膿毒癥的發(fā)病率高達(dá)3%,其中30%-50%的患者并發(fā)ALI或ARDS。急性肺損傷加重膿毒癥患者的臨床病情,影響疾病轉(zhuǎn)歸,其60天死亡率遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過非膿毒癥所致ARDS的患者。炎癥反應(yīng)是造成膿毒癥器官損傷和預(yù)后不佳的重要因素之一,白細(xì)胞和血小板被激活,釋放炎癥因子,損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞,導(dǎo)致系列器官功能障礙。
建立一種能客觀反映膿毒癥所致ARDS的臨床癥狀及評價(jià)藥效的動(dòng)物模型對開展膿毒癥所致ARDS的實(shí)驗(yàn)研究具有十分重要的意義。
LPS脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型

脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型

一、試劑耗材

脂多糖(LPS)

二、實(shí)驗(yàn)方法:

1、小鼠稱重,按體重計(jì)算藥物用量。

2、脂多糖(LPS)藥物配制,生理鹽水溶解,根據(jù)小鼠體重配制終濃度為10mg/kg,200ul/只腹腔注射使用。

3、抓取小鼠,捏緊小鼠頸背部皮膚,小拇指無名指疊加固定小鼠左下肢充分暴露小鼠腹部。

4、小鼠的頭部向下,這樣腹腔中的器官就會(huì)自然倒向胸部,防止注射器刺入時(shí)損傷腸道。進(jìn)針的動(dòng)作要輕乘,防止刺傷腹部器官。

5、注射器吸取準(zhǔn)備好的藥物,腹腔左下部與身體呈 45 度角左右斜角進(jìn)針注射LPS,注射完藥物后,輕微旋轉(zhuǎn)針頭退針,防止漏液。

6、造模18h處死小鼠解剖取組織進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。

三、檢測標(biāo)準(zhǔn):

肝組織有無:

1、肝水腫;

2、肝出血;

3、炎性細(xì)胞浸潤;

4、肝組織腫大等病理改變。

再觀察肝損傷程度,各按程度積分為:

0 分為無該項(xiàng)病理改變;

1分為病理變化輕且很局限;

2分為病理變化中等且局限;

3分為病變中等但廣泛或局部很顯著;

4分為非常顯著的廣泛性病理改變。求出各動(dòng)物的各項(xiàng)病理改變的總和,作為肝損傷程度積分。

 

  對照組;                       LPS組;

三、免疫組化切片檢測HE:

 

    NT組;                                           LPS組;