食品中的大腸桿菌進行快速準確的檢測已成為了人們經(jīng)常關(guān)注的問題。下面闡述食品中的大腸桿菌檢測的方法及分析 。
發(fā)酵法
這種方法主要是在44.5℃下的培養(yǎng)基上進行大腸桿菌的培養(yǎng),該培養(yǎng)基含有熒光底物,需要培養(yǎng) 24 h。然后對熒光底物進行釋放,需要采用葡萄糖醛酸進行,讓培養(yǎng)基能夠在紫外光的照射下發(fā)出熒光。采用這樣的方式方法,還可以進行統(tǒng)計學估計原來樣品中的菌落。主要步驟包括發(fā)酵、分離培養(yǎng)、二次發(fā)酵、顯微鏡觀察等 。
濾膜法
該方法主要過程:加入 10 mL 左右的無菌水于濾器中,然后摻入一些無菌水進行清潔濾器的內(nèi)壁,再進行過濾,將濾膜放在 M-FC 培養(yǎng)基中,兩者之間不能夠有氣泡,然后進行密封,存放溫度為 44.5℃,存放時間約 24 h,直到大腸桿菌的菌群變成藍色或藍綠色。然后記錄數(shù)據(jù),估算每一單位的水溶液菌群數(shù)量,然后進行大腸桿菌量值的換算 。
平板計數(shù)法
用無菌吸管吸取稀釋度樣品1 mL,該樣品與乳糖膽鹽發(fā)酵類似,然后將其放入無菌培養(yǎng)皿中,
再加入溫度于 45℃下的 CDLJ JD 顯色培養(yǎng)基中10 mL的量,并進行培養(yǎng)皿中溶液均勻混合,可以通過快速轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿的方式,等溶液凝固以后,加入5 mL左右 [3] ,然后快速搖晃培養(yǎng)基,使其可以均勻覆蓋平板表面,等其凝固以后,翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)基,在溫度37℃中培養(yǎng)24 h左右,然后觀察其形態(tài),顏色等變化。除此之外,平行設(shè)置兩個稀釋度培養(yǎng)基,步驟是先稀釋樣本,通過稀釋后,微生物可以分散為單個細胞,然后進行一定環(huán)境條件下培養(yǎng),直到其長成菌落為止,然后進行計算大腸桿菌的數(shù)量,通過稀釋度和樣本數(shù)量進行計算 。
免疫磁珠法
該分離技術(shù)的主要原理是以磁珠為載體和抗體,進行抗體和磁珠的結(jié)合,然后通過磁力技術(shù)完成力學的移動,進而分離大腸桿菌。與其他方式相比,這樣的方式方法具有一定的優(yōu)點,該技術(shù)可以提升樣本中病原性弧菌的檢測成功率,并且免疫磁珠技術(shù)可以于不同菌種中對不同的微生物進行處理,進而在很大程度上提高檢測效率 。
自動化儀器檢測法
主要是運用免疫自動化分析儀,該技術(shù)產(chǎn)生并運用于1970年。隨著科技的發(fā)展和進步,自動化儀器檢測技術(shù)應(yīng)用非常廣,并且操作起來非常方便,可以節(jié)約很多時間,其受干擾的程度較小,可以節(jié)省人力物力的投入,也可以提高檢測的精確度。在現(xiàn)階段的發(fā)展過程中,自動酶的免疫檢測體系的應(yīng)用非常廣 。
ATP生物發(fā)光法
在近些年的發(fā)展過程中,生物發(fā)光技術(shù)應(yīng)用范圍很廣,是一種比較快速的檢測微生物的技術(shù)。在活性細胞中,ATP是其常見的能量代謝產(chǎn),可以提供細胞生理活動過程中所需的能量。并且,該技術(shù)可以在生物體內(nèi)可以在一定范圍內(nèi)保持一定的含量。食品中的大腸桿菌檢測技術(shù)可以采用熒光光度的方法,因為生物體發(fā)光的原因是有熒光素酶的作用,產(chǎn)生了發(fā)光的效果。該物質(zhì)來源于北美的螢火蟲體內(nèi),可以催化熒光素的氧化作用,不過,該物質(zhì)性質(zhì)不穩(wěn)定,可以對熒光進行快速分解。另外,該檢測技術(shù)結(jié)果獲得過程是非常快的,并且該設(shè)備攜帶方便,十分適用于現(xiàn)場檢測